Фармакогностическое исследование представителей семейства Rosaceae и Asteraceae флоры Красноярского края

Фармакогностическое исследование представителей семейства Rosaceae и Asteraceae флоры Красноярского края Выполнили: МБОУ « ОУ Гимназия № 10» Дорохин Алексей, Грищенко Иван

Постановка и формулировка проблемы Для расширения сырьевой базы и создания эффективных оригинальных препаратов необходимо проводить поиск новых сырьевых источников лекарственных растений, расширять изучение природных биологически активных веществ. Черемуха и пижма, произрастающие в Красноярском крае, являются перспективными источниками получения витаминных и противовоспалительных препаратов.

Цель работы Фармакогностическое изучение представителей семейства Rosaceae и Asteraceae флоры Красноярского края для получения растительных средств антимикробного, противовоспалительного и вяжущего действия, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний органов пищеварения.

Основные задачи Изучить ассортимент растительных средств, применяемых для лечения заболеваний органов пищеварения; дать анализ современного состояния изученности растений сем Rosaceae и Asteraceae; Провести изучение химического состава пижмы обыкновенной и черемухи обыкновенной флоры Красноярского края; Установить закономерности накопления и распределения БАВ по органам и фазам развития пижмы обыкновенной, обосновать рациональные сроки заготовки для указанного вида сырья; Провести количественное содержание БАВ в листьях черемухи обыкновенной в период цветения из различных районов Красноярского края.

Объекты исследования: - надземная часть (листья, стебли, соцветия) пижмы обыкновенной, собранные в период вегетации в Курагинском районе Красноярского края.

- листья черемухи обыкновенной в период цветения, собранные в 4 районах Красноярского края и окрестностях г. Красноярска: № образца Место сбора № образца Место сбора 1 г. Минусинск 5 г. Красноярск, район завода «Крастяжмаш» 2 г.Лесосибирск 6 г. Красноярск, район ТЭЦ-3 3 п. Емельяново 7 г. Красноярск, Академгородок 4 Красноярское водохранилище 8 г. Красноярск, район завода «Краз»

Методы исследования: Определение дубильных веществ Метод основан на окислении танинов водным раствором пермаганата калия с применением в качестве индикатора индигосульфокислоты. Содержание дубильных веществ в процентах вычисляют по формуле: где V1 - объем 0,1 н.KMnO4, пошедшего на титрование, мл; V2 - объем 0,1 н. KMnO4, пошедшего на контрольный опыт, мл; K – поправка на титр, D – коэффициент пересчета на танин: для гидролизуемых дубильных веществ равен 0,004157, для конденсированных – 0,00582; V – общий объем экстракта, мл; m – масса навески сырья, г; V3 – объем экстракта, взятого для титрованиия, мл. 2. Определение органических кислот В коническую колбу помещают 20 мл фильтрата, отмеренного пипеткой, добавляют 3-4 капли фенолфталеина и титруют раствором едкого натрия до слабо-розового окрашивания. Содержание органической кислоты в процентах определяют по формуле: V – количество 0.1н раствора щелочи, израсходованной на титрование, мл; К – коэффициент для пересчета на соответствующую кислоту; V1 – объем вытяжки, приготовленной из навески исследуемого продукта, мл; m- масса навески или объем исследуемого продукта, г или мл;V2 – количество фильтрата, взятого для титрования, мл

3.Определение пигментов Сущность метода заключается в измерении оптической плотности вытяжки (экстракта) пигментов на спектрофотометре при длинах волн, соответствующих максимумам поглощения хлорофиллов a (663 нм) и b (645 нм) и максимуму поглощения каротиноидов (440,5 нм), с последующим расчетом концентрации пигментов по уравнениям Вет штейна и Хольма: Ca = 9,784D662 - 0,99D644; Cb = 21,426D644 - 4,650D662; Ca+Cb = 5,134D622 + 20,436D644; Скар = 4,695D440,5 - 0,268D(Ca + Cb), где: Са - концентрация хлорофилла а, мг/дм ; СЬ - концентрация хлорофилла b, мг/дм ; Скар - концентрация каротиноидов, мг/дм3. Содержание пигментов (мг/100г) находят по формуле х = CVV2 . 100 / нVl. 1000, где: С - концентрация пигмента, мг/дм3; V - объем исходной вытяжки, см3; V1- объем исходной вытяжки, взятой для разбавления, см ; V2 - объем разбавленной вытяжки, см ; н - масса навески. Содержание пигментов в растительном сырье определяли на спектофотометре ПромЭколаб ПЭ-5300В. Экстракцию пигментных комплексов из сырья проводили ацетоном.

4. Определение аскорбиновой кислоты Метод основан на редуцирующих свойствах аскорбиновой кислоты. Синяя краска (индикатор), 2,6-дихлорфенолиндофенол, восстанавливается в бесцветное соединение экстрактами растений, содержащими аскорбиновую кислоту (реакция Тильманса). Кислотные вытяжки из растений титруют раствором индикатора (известного титра) до наступления розового окрашивания, обуславливаемого избытком индикатора в кислой среде. Количество витамина С (Х) в образце вычисляют по формуле: где а- объем краски (с вычетом поправки на титрование чистого растворителя), которая пошла на титрование экстракта, мл; Т- титр краски по аскорбиновой кислоте; V- общий объем вытяжки, мл; V1- объем экстракта, взятого для титрования, мл; m- масса навески, г. 5. Статистическая обработка данных Статистическую обработку результатов исследований проводили на ПЭВМ с применением программного пакета Microsoft Excel.

Результаты сравнительного фитохимического анализа листьев черемухи обыкновенной, собранных в различных районах Красноярского края № образца Район сбора Витамин С мг/100г Дубильные вещества, % Органические кислоты % перерасчет на яблочную кислоту 1 г. Минусинск 363,5±18,10 10,55±0,52 2,13±0,1 2 г.Лесосибирск 362,10±18,10 9,40±0,47 1,84±0,09 3 п. Емельяново 270,65±13,50 5,92±0,30 1,51±0,07 4 Красноярское водохранилище 326,94±16,35 6,48±0,32 1,82±0,09 5 г. Красноярск, район завода «Крастяжмаш» 252,33±12,60 5,72±0,30 1,14±0,06 6 г. Красноярск, район ТЭЦ-3 242,35±12,00 5,65±0,28 1,13±0,05 7 г. Красноярск, Академгородок 268,21±13,4 5,88±0,30 1,14±0,06 8 г. Красноярск, район завода «Краз» 147,61±7,40 4,7±0,24 0,76±0,04

Содержание биологически активных веществ в надземных органах пижмы обыкновенной Месяц сбора Органические кислоты % перерасчет на яблочную кислоту Дубильные вещества, % Хлорофилл А мг/100 Хлорофилл В мг/100 Каротиноиды мг/100 Витамин С, мг/% Листья Июнь 0,92±0,04 12,98±0,65 64,17±1,20 34,16±1,70 12,05±0,60 17,50±0,80 Август 0,78±0,04 10,22±0,51 46,56±1,30 28,58±1,40 10,98±0,60 14,2±0,70 Сентябрь 0,67±0,03 8,35±0,41 34,82±1,70 18,66±0,93 8,88±0,45 10,15±0,50 Соцветия Июль 1,12±0,05 8,10±0,40 10,94±0,54 13,57±0,60 20,8±0,10 12,10±0,60 Сентябрь 0,75±0,03 5,70±0,28 2,85±0,14 2,66±0,13 20,3±0,10 9,20±0,40 Стебли Июнь 1,94±0,10 12,56±0,63 1,07±0,05 1,42±0,07 0,38±0,20 * сентябрь 1,74±0,08 9,62±0,48 1,97±0,10 2,88±0,15 0,76±0,04 *

Выводы 1.Анализ ассортимента растительных средств, применяемых для лечения и профилактики заболеваний органов пищеварения, показал необходимость разработки средств с антимикробным, противовоспалительным и вяжущим действием отечественного производства, в том числе из растений семейства семейства Rosaceae и Asteraceae. 2.Установлено, что в листьях черемухи обыкновенной (г. Минусинск, г. Лесосибирск) содержание основных БАВ (дубильных веществ, органических кислот, аскорбиновой кислоты) больше, чем в сырье из других районов. 3. Установлены в ходе фармакогностических исследований некоторые закономерности накопления и распределения БАВ по органам и фазам развития пижмы обыкновенной. 4.Для сырья пижмы обыкновенной подобраны оптимальные условия заготовки, сушки и предварительной обработки.